ساخت cdnaی نوترکیب ژن vegf-a با استفاده از آنزیم eco۳۱i

نویسندگان

فریبا دهقانیان

fariba dehghanian زهره حجتی

zohreh hojati

چکیده

امروزه، سنتز cdnaی ژن های مختلف به طور گسترده در حوزه ی بیوتکنولوژی مطرح بوده و به دلیل کاربردهای زیاد cdna روش های متعددی برای رسیدن به این هدف پیشنهاد شده است. در ارتباط با بسیاری از ژن ها، همواره نیاز به یک روش ساده تر، سریع تر، دقیق تر و کم هزینه تر در راستای سنتز cdna آ ن ها مطرح بوده است. در مطالعه حاضر با استفاده از روش مبتنی بر آنزیم های نوع iis (eco31i) اگزون های تشکیل دهنده ایزوفرم vegf-111 از ژن vegf-a از طریق واکنش های pcr مجزا تکثیر شده و در نهایت پس از انجام واکنش های هضم آنزیمی و ligation، cdna ایزوفرم vegf-111 سنتز گردید. در این روش انجام مطالعات بیوانفورماتیکی و طراحی پرایمرهای ویژه به کمک نرم افزار الیگو7 از اهمیت بالایی برخوردار است. ایزوفرم vegf-111 در بافت های نرمال بیانی ندارد و تنها در لاین های سلولی خاصی که در معرض نور uv-b و یا گروهی از مواد ژنوتوکسیک قرار گرفته اند بیان می شود؛ بنابراین سنتز cdna آن از اهمیت ویژه ای برخوردار است. vegf-111 با توجه به ویژگی های رگ زایی قوی و مقاومت در برابر پروتئازهای سلولی به عنوان یک فاکتور درمانی نویدبخش در راستای درمان بیماری های ایسکمیک مطرح می گردد.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

طراحی و ساخت وکتور نوترکیب واجد ژن Vpr ویروس نقص ایمنی اکتسابی انسانی (HIV) با استفاده از وکتور EGFP-N1

Background and purpose: The purpose of this study was to design a recombinant vector pEFGP- N1 containing the full length of HIV-1Vpr gene. To the best of our knowledge, the cloning of Vpr gene in pEGFP_N1 is not previously done. Materials and methods: As a source of Vpr gene the pUC19-Vpr recombinant vector was confirmed by digestion with restriction enzymes BglII and NotI in order to separ...

متن کامل

طراحی، ساخت و بیان وکتور نوترکیب ژن نوکلئوپروتیین ویروس هاری

Background: Rabies is an acute encephalitis that causes more than 60,000 deaths worldwide. The only way to save individuals bitten by a rabies-infected animal is the timely use of effective vaccines. Treatment with new generation vaccines is expensive. Therefore, there is a global movement towards the production of less expensive vaccines which retain and improve upon the quality and effectiven...

متن کامل

کلونینگ، بیان، خالص سازی و ارزیابی آنزیم لیزواستافین نوترکیب با استفاده از سیستم کلونینگ pBAD

Background and purpose: Staphylococcus aureus is an important nosocomial pathogen which causes some diseases such as endocarditis, osteomyelitis, pneumonia, toxic shock syndrome, and food poisoning. The excessive and inappropriate use of antibiotics in the treatment of these diseases causes resistance to many antibiotics. Lysostaphin is an effective agent in the treatment of staphylococcal infe...

متن کامل

کلون و بیان ژن نوترکیب هومون رشد با استفاده از برچسب تیوردوکسین

هدف: در قرن حاضر، تولید داروهای نوترکیب افزایش یافته است. از جمله این داروها، هورمون رشد می‏باشد که به‏علت مشکلاتی که در پروسه­ی بیان نوع سیتوپلاسمی و پری پلاسمی این پروتئین وجود دارد، یافتن راه حلی که بتواند بیان را بهینه نماید ضروری به‏نظر می‏رسد. لذا در این تحقیق با استفاده نمودن از trx-tag بیان هورمون رشد را به‏صورت محلول بهینه شد که علاوه بر افزایش بیان پرتئین (حل مشکل پری...

متن کامل

طراحی و ساخت وکتور نوترکیب واجد ژن vpr ویروس نقص ایمنی اکتسابی انسانی (hiv) با استفاده از وکتور egfp-n۱

سابقه و هدف: در این پروژه، هدف کلی تحقیق طراحی و ساخت وکتور نوترکیب واجد ژن تمام طول vpr ویروس نقص ایمنی اکتسابی انسانی (hiv-1) با استفاده از وکتور pegfp-n1 بود. کلونینگ ژن vpr قبلاً درون وکتور pegfp_n1 صورت نگرفته بود. مواد و روش ها: وکتور puc19 دارای ژن تمام طول vpr جهت تایید با استفاده از آنزیم های محدود کننده برش داده شد. سپس جهت اضافه کردن سایت های برش آنزیمی (xhoi, kpni) در ژن مورد نظر مطا...

متن کامل

کلونینگ و بیان ژن آنزیم ضد قارچ نوترکیب کیتیناز باسیلوس پومیلوس در باسیلوس سوبتیلیس 168

  سابقه و هدف: کیتین، پلی ساکارید خطی و یکی از فراوان‌ترین پلی ساکاریدهای طبیعی است که جزء اصلی ساختار دیواره سلولی بسیاری از موجودات است. کیتینازها، آنزیم‌های اصلی کاتالیز‌کننده کیتین به اجزاء مونومری و الیگومری‌ آن هستند و می‌توانند به عنوان یک عامل ضد قارچ طبیعی استفاده شوند. هدف از این تحقیق کلونینگ و بیان ژن نوترکیب کیتیناز در باکتری باسیلوس سوبتیلیس در درمان عفونت‌های قارچی و جای‌گزینی آن...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
genetics in the 3rd millennium

جلد ۱۱، شماره ۱، صفحات ۲۹۸۰-۲۹۸۹

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023